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步态分析 ​

RodentLimb 从行走小鼠的仰视视频中,测量每只爪的支撑相(着地)和摆动相(离地),再计算空间、时间和协调指标。方法参照 LocoMouse(Machado 等,2015)、CatWalk 类指标(Hamers 等,2001),以及 Sheppard 等(2022)的逐步幅分析方法,包括其对行走速度的处理。

拍摄 ​

直线步道的仰视拍摄,≥ 60 fps。如需厘米单位,在画面中放一次标尺。见拍摄要点。

支撑相与摆动相 ​

爪静止在地面上即为支撑相。每一帧取该爪前后两步位移中较小的一个作为速度,这样着地帧和离地帧不会被漏掉(中心差分会漏掉它们)。速度低于下式时为支撑相:

max(支撑相速度下限 × BL/s,支撑相速度比 × 身体速度)

身体速度为鼻尖与尾根中点的速度。短于“最短相位”(30 毫秒)的相位会并入相邻相位。每次支撑相对应一个足印,即支撑期间爪的平均位置。

支撑相、摆动相、步幅与相位

小跑时的足落模式。一个步幅为同一只爪相邻两次着地之间;另一只爪的相位是它在该步幅中着地的时刻。

哪些步幅计入 ​

只有满足以下条件的步幅才计入:

  • 时长不超过“最长步幅时长”(1 秒);
  • 身体速度不低于“最低行走速度”(1.0 BL/s);
  • 直线行走:平均角速度绝对值 ≤“最大转向角速度”(30 °/s;Sheppard 等使用 ±20 °/s);
  • 不是每段连续行走的首尾步幅,因为此时小鼠在加速或减速(可关闭)。

“因转向排除的步幅”告诉你有多少步幅因转向被排除。

指标 ​

速度 ​

指标定义
行走速度计入步幅的平均身体速度(cm/s 或 BL/s)
速度变异系数步幅速度的标准差 ÷ 均值
分析步幅数、行走时间占比数量,以及速度高于最低行走速度的帧比例

空间参数 ​

指标定义
步幅(前肢、后肢;后肢另给体长单位)同一只爪相邻两个足印的距离
后肢步长左后爪足印到下一个右后爪足印沿行走方向的距离
支撑面宽度(前肢、后肢)左右足印在垂直于行走方向上的距离(步宽)
足印位置(左、右)后爪足印与同侧前一个前爪足印之间的距离

时间参数 ​

指标定义
步频1 ÷ 后肢平均步幅时长
支撑相、摆动相(前肢、后肢)时长
占空比(前肢、后肢)支撑相 ÷ 步幅时长 × 100

速度匹配值 ​

几乎所有步态指标都随速度变化(Batka 等,2014),因此直接比较行走速度不同的组的原始均值可能产生误导。RodentLimb 对每只动物拟合该指标随步幅速度变化的直线,读取参考速度(默认 2.0 BL/s)处的数值:

  • 后肢步幅(BL)、步频、后肢占空比和后肢摆动相 @ 参考速度。

需要至少 8 个速度有一定差异的后肢步幅。如果动物从未在参考速度附近行走(超出其实际速度范围的 0.75–1.25 倍),则留空而不外推。整个研究请使用同一个参考速度。如果你更想用以速度为协变量的混合模型(Sheppard 等,2022),步幅导出表中有每一步的速度。

变异与对称 ​

指标定义
步幅 / 步时变异系数后肢步幅的标准差 ÷ 均值;共济失调时升高(Machado 等,2015)
后肢步幅左右不对称(左 − 右)÷ 左右均值 × 100

协调 ​

指标定义
肢间相位(目标爪着地 − 参考爪着地)÷ 参考爪步幅时长,包括 LH→RH、LF→RF、LH→LF、LH→RF;圆形均值,0–1
后肢耦合强度 RLH→RH 相位的合成向量长度:1 = 完全一致,0 = 随机
规律性指数4 × 正常步序模式数 ÷ 着地次数 × 100(Cheng 等,1997)
步态模式(慢走、小跑、跑步、跳跃 %)按每个后肢步幅分类,参照 Bellardita & Kiehn(2015):后肢相位 0.5 ± 0.15 → 慢走,若对角(LH→RF)相位为 0 ± 0.15 则为小跑;后肢相位 0 ± 0.15 → 跳跃;其余为跑步

相位 0.5 表示两只爪交替,0 或 1 表示同步。

全身姿态 ​

指标定义
鼻尖 / 尾根侧向摆动每个步幅内,该点相对“步幅起止时身体中心连线”的左右摆动幅度,单位 BL(Sheppard 等,2022)
鼻尖 / 尾根摆动相位该点偏到一侧最远时处于步幅中的位置(圆形均值,0–1)

图表 ​

  • 足落模式(概览与回放):LF、RF、LH、RH 的支撑相色条。在回放中跟随视频移动。
  • 步态模式:慢走、小跑、跑步、跳跃步幅的占比。
  • 各爪参数表、肢间协调相位盘和足印分布图(全部指标)。

参数 ​

参数默认值作用
支撑相速度比0.8 × 身体速度在 30–100 fps 模拟数据上偏差最小的值
支撑相速度下限0.8 BL/s身体移动很慢时使用的最低阈值
最短相位0.03 秒更短的支撑/摆动抖动会被合并
交换左右标签关用于镜像画面
最低行走速度1.0 BL/s更慢的步幅不计入
最大转向角速度30 °/s转向更快时的步幅不计入
去掉每段行走的首尾步幅开排除加速和减速
最长步幅时长1.0 秒更长的间隔视为停顿,不算步幅
参考速度2.0 BL/s用于速度匹配值
位置平滑0.03 秒比其他范式更轻,因为摆动相只有约 0.1 秒